Сфера застосування низькотискової рідкохроматографічної сепарації: наукові дослідження та підготовка в біохімії, синтетичній хімії, природних продуктах, розробці лікарських засобів, харчовій хімії, агрохімії, косметики, полімерів та нафтохімії. Гель-фільтраційний трафіліз, гідрофобний трафіліз та інші методи можуть бути використані для ізоляції білків, ферментів, нуклеокислот, нуклеотидів, поліпептидів, (з / без ароматичних амінокислот) та будь-яких інших біологічних / небіологічних зразків з ультрафіолетовим поглинанням, виявлення потоку, ідеальний вибір для очищення біомолекул, він має багато функцій, простоту в використанні, економіку та інші особливості. Невелика конструкція для максимальної економії холодильного складу та лабораторного простору.

Примітка

Вимоги до технічних показників високопродуктивного подвійного ультрафіолетового детектора в конфігурації системи використовуються для кількісного тестування на фармацевтичних заводах по всій країні. Особливості обладнання

Вимірювання двох довжин хвиль білка 280nm/254nm

Білкові молекули містять двозв'язані ароматичні амінокислоти, такі як тирозин і трин. Вони мають властивості поглинання ультрафіолетового світла, його пік поглинання на довжині хвилі 280 нм, і в цій довжині хвилі значення щільності поглинання піка є позитивно пропорційним до його концентрації, тому може бути в якості білка, кількісне визначення основи, саме тому, метод ультрафіолетової поглинання на довжині хвилі 280 нм зазвичай використовується для безперервного моніторингу концентрації білка в системі паралізу. Але оскільки різні білки містять різні вмісти тирозіну та триніну, для точного визначення кількості необхідно мати чистий білок, який має бути вимірений, як стандарт для порівняння, або вже знає його коефіцієнт фотознищення як посилання. Крім того, багато не білкових речовин також мають визначену поглинаючу здатність при довжині хвилі 280 нм, що може викликати перешкоди. Особливо сильніше впливають на нуклеїнові кислоти (пурини та пиримидини). Поглинання при 280 нм в 10 разів сильніше, ніж білок (на грам), але

Нуклеїнова кислота поглинається сильніше на 254 нм, пік поглинання близько 254 нм. Коефіцієнт поглинання нуклеїнової кислоти на 254 нм вдвічі більший, ніж на 280 нм, в той час як білки, навпаки, поглинають 280 нм ультрафіолетовий більше, ніж значення поглинання на 254 нм.

Зазвичай

Співвідношення поглинання світла в чистому білку: A280/A254 1,8

Співвідношення поглинання світла для чистої нуклеїнової кислоти: A280/A254 0,5

Тому при одночасній присутності нуклеїнової кислоти в розчині білка (як це відбувається в більшості біологічних систем), необхідно визначити одночасно OD254 нм і OD280 нм. Потім на основі співвідношення поглинання двох довжин хвиль реальний вміст білка розраховується за допомогою емпіричних формул, щоб усунути вплив нуклеїнової кислоти.

Концентрація білка = 1,45 × A280 – 0,74 × A254 (мг/мл)

Ця експериментальна формула була встановлена за допомогою даних, визначених рядом сумішей білків (дрожжів енололази) і нуклеїнових кислот (дрожжів нуклеїнових кислот) у відомих різних співвідношеннях концентрацій.

Налаштування системи